研究生: |
馮蕙卿 FERNG, HUEY-CHING |
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論文名稱: |
純化與分析P388D1巨噬細胞細胞株所分泌的漿細胞瘤抑制素 Purification and characterization of plasmacytoma growth inhibitors secreted by P388D1 macrophage-like cell line |
指導教授: |
曾哲明
Tseng, Jer-Ming |
學位類別: |
碩士 Master |
系所名稱: |
生命科學系 Department of Life Science |
畢業學年度: | 80 |
語文別: | 中文 |
論文頁數: | 53 |
中文關鍵詞: | 細胞株 、抑制因子 、漿細胞瘤 |
論文種類: | 學術論文 |
相關次數: | 點閱:139 下載:0 |
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P388D1 巨噬細胞細胞株可以分泌抑制因子抑制MOPC-315漿細胞瘤及MPC-11,FO等
骨髓瘤細胞株的生長,而且此抑制效隨P388D1上清液含量的增加而增加,但是對另
一種漿細胞瘤J558的生長卻沒有影響。以MOPC-315為材料做實驗時發現在培養的第
3天與第4天有顯著的抑制效果,而細胞需與P388D1上清液共存6小時以上才能觀
察到抑制效果,共存24小時以後抑制作用達到最大。由Cr51胞殺作用的結果得
知,抑制因子抑制MOPC-315漿細胞瘤生長的現象部份是由於胞殺作用所致。抑制因
子對胰蛋白酵素(trypsin) 敏感,加上會破壞雙硫鍵的試劑2-mercaptoethanol 和
cysteine buffer 都會影響抑制因子的活性,顯示抑制因子可能是具有雙硫鍵結構
的蛋白質,而且雙硫鍵存在與否對其活性影響很大。雖然抑制因子為蛋白質,但對
高溫具有耐受性,在56℃加熱30分鐘或在 100℃加熱20分鐘都不會失去活性。
文獻指出 neutral protease, IL-1,TNFα 及 arginase 等巨噬細胞分泌物對腫瘤
細胞具有胞殺或抑制細胞生長的作用,而本實驗結果顯示,無論加入PMSF(為pro-
tease inhibitor),抗IL-1抗體,抗TNF-α抗體或是在培養時添加足夠細胞生長所
需的 arginine 均無法降低 P388D1 分泌之抑制因子的活性。經DEAE離子交換法與
Sephacryl S-300 gel filtration 初步純化的結果顯示抑制因子可能有四種,其
分子量約為:500,000 Da以上 (peakl), 112,000Da (peak2), 45,000Da (peak3),
18,000Da (peak4)。