研究生: |
王月雲 Wang, Yue-Yun |
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論文名稱: |
蓖麻凝集素之生理功能研究 |
指導教授: |
楊冠政
Yang, Guan-Zheng |
學位類別: |
碩士 Master |
系所名稱: |
生命科學系 Department of Life Science |
畢業學年度: | 68 |
語文別: | 中文 |
中文關鍵詞: | 蓖麻凝集素 、生理功能 、生物學 |
英文關鍵詞: | BIOLOGY |
論文種類: | 學術論文 |
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將蓖麻 (Ricinus Communis L) 去殼後,以磷酸鹽液抽取,利用 Sepharose-4B 親
和性圓柱色層分析,以 0.2M Galactose 沖溶洗出而取得蓖麻植物凝集素(Ricinus
Communis Agglutinin)簡稱R.C.A.。再經Sephadex G-100分離而得二種蛋白,分別
記為RCA-I&RCA-II。RCA-I 對血球具有甚強的凝集能力,而RCA-II對小老鼠 (19±
1g) 有致死作用,甚LD50為0.03mg/kg 個體。將新鮮蓖麻種子播種在潮濕蛭石中置
30℃,12小時光照,光強為6000lux 的植物培養箱內,經過21天的培養,每天澆以
Hoagland's完全液。取一週內植株幼苗及9,11,14,19&21 天的植株區分為根、莖、
葉,抽取純化,並定量RCA 含量,利用電泳、凝血能力、動物毒性及免疫反應等方
法研究蓖麻種子發芽過程中R.C.A 的分佈及消長情形。結果顯示生長第三天時,其
R.C.A 含量已減為原來的三分之一,至第七天只剩下十分之一,利用凝集試驗不論
在根、莖、葉等部位均含有R.C.A 。到第九天後,萎縮胚乳尚存留一些,但根、莖
、葉等處R.C.A 完全消失。於培養第十四天後,不論植株的任何部位均未找到更快
。經毒性試驗得相同結果,由電泳及免疫擴散反應,確認植株抽取所得R.C.A 和種
子內取得相同。
將R.C.A ,雞母珠凝集素(Abrin) 及Concavalin A分別作對常見土壤真菌及土壤細
菌生長的影響,利用挖洞法發現R.C.A 對某些腐生菌及兼性生的植物病原菌有抑制
生長作用。尤其R.C.A 對一些不完全菌綱的真菌,如:Fusarium solani, Asperg-
illus fischeri, Mucor rouxii 等有明顯抑制作用,而R.C.A 對 Penicillin,
Cladosporium, Rhizotonia抑制較差,但R.C.A 對常見酵母菌沒有抑制作用。據分
析這些能被R.C.A 抑制的真菌,其菌絲細胞壁構造均為葡萄糖聚合物(glucan)或幾
丁質組成。雞母珠凝集素對土壤真菌抑制較弱,而Con A 即使提高至每ml含7mg ,
仍無抑制作用。
利用Filter dish 方法檢查十五種常見的土壤細菌,發現都沒有抑制作用。由上結
果推測植物體重子內含凝集素,有些除了對動物具有致死及保護繁衍之用,有些豆
科植物的凝集素具有選擇其共生根瘤菌的專一性。本研究證明也許凝集素對土壤微
生物有保護機制,尤其對土壤真菌扮演了一種防衛角色。特別是種子早期埋於土壤
內發生浸潤作用。膨脹及萌芽過程中,當種子破皮時,本身可防禦病原菌之侵入,
當植物新生葉長出能進行光合作用,不必仰賴胚乳供給養分時對外來病原菌抵抗力
加強,也許就不再需要凝集素的保護,這有待進一步的證實。