研究生: |
趙珮玲 Zhao, Pei-Ling |
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論文名稱: |
子宮頸癌細胞株內第十六型人類乳突瘤病毒及致癌基因的基因表現 Effects of metabolic inhibitors on the regulation of the expression of type 16 human papillomavirus genes and the c-myc oncogene in a cervical carcinoma cell line |
指導教授: |
朱廣邦
Zhu, Guang-Bang 李銘亮 Li, Ming-Liang |
學位類別: |
碩士 Master |
系所名稱: |
生命科學系 Department of Life Science |
畢業學年度: | 78 |
語文別: | 中文 |
論文頁數: | 55 |
中文關鍵詞: | 子宮頸癌細胞 、株內第十六型 、人類乳突病毒 、致癌 、基因 、細胞株 、生物學 |
英文關鍵詞: | "(HUMAN-PAPILLOMAVIRUS,HPV), CC7T/VGH, BIOLOGY, (HUMAN-PAPILLOMAVIRUS,HPV)" |
論文種類: | 學術論文 |
相關次數: | 點閱:227 下載:0 |
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分子生物學的研究, 已對人類乳突瘤病毒 (Human papillomavirus,HPV) 基因體的結
構及其功能有深入的瞭解, 但它致病的機制及與宿主間的關係卻尚未明瞭。本實驗的
目的為探討是否有宿主細胞的因子影響 HPV及c-myc 致癌基因的表現, 所採用的方法
是利用環己亞胺 (cycloheximide)將宿主細胞蛋白質的合成功能抑制, 觀察其對 HPV
及 c-myc致癌基因表現的影響。
細胞株 (CC7T/VGH) 為子宮頸癌細胞, 約含500-600 套 HPV16分子, 且 HPV16在此細
胞株內, 以插入式及游離式同時存在, 另外, 其 c-myc的表現也高出正常細胞約20倍
以上, 為研究 HPV病毒及 c-myc致癌基因與宿主間關係的一個適當的細胞株。
在 CC7T/VGH 中, HPV16 之主要轉錄本 (transcripts)有4.21kb, 3.7kb,1.55kb,1.1
7kb 四種。CC7T經環己亞胺 (10μg/ml) 處理, Northern轉印雜交後的結果顯示隨著
時間的增加, HPV16 RNA 的量亦隨著增加, 但四種 HPV16轉錄本受環己亞胺的影響並
不相同, 環己亞胺對4.21kb及 3.7kb兩種影響較小, 處理 6小時後, RNA 約只增加 1
.5倍左右, 然而對1.55kb及1.17kb卻分別有 5.6倍及 6.2倍增加之多。
為了探討此種增加的現象是由於 RNA的穩定性增加, 或是因為 RNA合成速率增加, 本
實驗利用 RNA合成抑制劑-放射菌素 (actinomycin D) 來測定經環己亞胺處理前後RN
A 之穩定性, 結果發現經環己亞胺處理後, 四種 HPV16轉錄本的穩定性均增加, 4.21
kb, 3.7kb,1.55kb, 及1.17kb之穩定性分別增加 1.8, 3.1,0.6,及 2.3小時。
另一方面, 本實驗亦採用同樣方法觀察環己亞胺對 c-myc致癌基因的影響, 發現 c-m
yc RNA也有增加的現象, 處理 6小時後, RNA 較未處理前增加 5.9倍, 轉錄本的半衰
期也增加 0.6小時。
從上述結果, 我們可推論有某種蛋白質分子抑制 HPV16及 c-myc的轉錄作用, 此類蛋
白質的半衰期很短, 極不穩定, 但其對四種 HPV16轉錄本的影響有很大的差異。此抑
制蛋白的存在及其特性尚有待進一步之証實與探討。
#50000996
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