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研究生: 陳蘭英
CHEN, LAN-YING
論文名稱: 以雙向電泳分析耐砷細胞的蛋白質表現
指導教授: 黃昭蓮
Huang, Zhao-Lian
詹崑源
Zhan, Kun-Yuan
學位類別: 碩士
Master
系所名稱: 生命科學系
Department of Life Science
畢業學年度: 76
語文別: 中文
論文頁數: 3
中文關鍵詞: 雙向電泳耐砷細胞蛋白質亞砷酸納
英文關鍵詞: SA-7
論文種類: 學術論文
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  • SA-7是利用逐漸增加亞砷酸鈉的濃度從中國倉鼠卵巢細胞篩選出的耐砷細胞株。SA-&
    對亞砷酸鈉的耐受能力是原來細胞的7 倍。細胞對藥物的耐受機制通常與蛋白質有密
    切的關係,因此本論文利用雙向電泳分析SA-7蛋白質的表現,藉以判定細胞產生耐砷
    能力的可能機制。當細胞以硫-35-甲硫胺酸標記16小時以後用非平衡酸鹼梯度電泳
    系統分析鹼性及中性蛋白質發現SA-7有三個中性蛋白質過量表現,它們的分子量及等
    電點分別為:Mr38 KDa, pI7.5 ;Mr28 KDa, pI7.5 ;Mr27 KDa, pI7.6 。因
    為SA-7不論是培養在含有亞砷酸鈉的培養液或是不含亞砷酸鈉的正常培養液都可過量
    合成這三個蛋白質,因此這三個蛋白質的表現是一種穩定的表現,不是因為培養環境
    含有工砷酸鈉而短暫誘導合成。當細胞以硫-35-甲硫胺酸僅標記30分鐘時,這三個
    蛋白質並沒有過量表現,表示這三個蛋白質在SA-7的過量表現不是因為蛋白質合成速
    率增加。SA-7長期培養於不含亞砷酸鈉的培養液,耐砷能力降低,同時在SA-7看到過
    量表現的三個蛋白質的合成也降低,這結果顯示這三個蛋白質的存在與細胞耐砷的特
    性有密切的關係。利用細胞胞器分離法發現這三個蛋白質存在SA-7的細胞質部分,因
    此這三個蛋白質可能是結合蛋白質,將砷吸附於蛋白質表面,使得砷化物無法發揮毒
    性,或者此三個蛋白質是一些特殊的酵素系統,可將砷化物代謝成毒性較低的砷化物

    此外利用等電焦集雙向電泳法分析細胞的中性及酸性蛋白質發現30μM 亞砷酸鈉足以
    誘發親本細胞大量合成70KDa hsp c 熱休克蛋白質,但是SA-7在相同的處理情況下70
    KDa hsp c 熱休克蛋白質並沒有大量合成,為了想知道SA-7對熱處理是否有相同的反
    應,因此將SA-7以熱處理30分鐘再以硫-35-甲硫胺酸標記4 小時,發現熱處理可增
    君SA-7合成70KDa hsp c 熱休克蛋白質的合成。從SA-7亞砷酸鈉大量誘發熱休克蛋白
    質的途徑被抑制,而熱處理仍能造成熱休克蛋白質增加的現象推測熱及亞砷酸鈉對70
    KDa 熱休克蛋白質的誘導途徑可能是不一樣的。

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